一、工作原理

 

　　UV紫外光度計(jì)通過測(cè)量樣品對(duì)紫外線和可見光的吸收程度來獲得樣品的光譜數(shù)據(jù)。光源發(fā)出的光線通過單色儀分解成不同波長(zhǎng)，照射到樣品上。樣品根據(jù)其特性吸收部分光線，剩余的光線通過樣品并被探測(cè)器檢測(cè)。通過測(cè)量吸光度（Absorbance,A）來反映樣品中物質(zhì)的濃度。吸光度與濃度之間的關(guān)系由比爾-朗伯定律（Beer-LambertLaw）描述，該定律表明吸光度與物質(zhì)的濃度呈正比關(guān)系。

 

　　二、校準(zhǔn)目的

 

　　它的校準(zhǔn)是通過調(diào)整儀器參數(shù)和驗(yàn)證測(cè)量精度，確保獲得準(zhǔn)確可靠的光譜數(shù)據(jù)。常見的誤差來源包括光源不穩(wěn)定、儀器老化、溫度變化等。通過定期校準(zhǔn)，可以減少這些誤差，確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性與可重復(fù)性，進(jìn)而保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

 

　　三、常見校準(zhǔn)方法

 

　　UV紫外光度計(jì)的校準(zhǔn)方法主要包括以下幾個(gè)步驟：

 

　　1.零點(diǎn)校準(zhǔn)（BlankCalibration）

 

　　零點(diǎn)校準(zhǔn)是校準(zhǔn)過程中最基本的步驟，通常通過測(cè)量空白樣品（溶劑或背景液體）來進(jìn)行。空白樣品應(yīng)該是與實(shí)驗(yàn)樣品具有相同溶劑和溶液條件的溶液。將空白樣品置入光度計(jì)中，并進(jìn)行基線校準(zhǔn)，確保儀器在沒有任何吸收物質(zhì)的情況下輸出零吸光度值。這樣可以消除溶劑的干擾，確保后續(xù)實(shí)驗(yàn)中的吸光度測(cè)量準(zhǔn)確。

 

　　2.波長(zhǎng)校準(zhǔn)

 

　　它的波長(zhǎng)校準(zhǔn)是確保儀器在所選波長(zhǎng)下準(zhǔn)確工作的關(guān)鍵步驟。通常使用已知吸收峰的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，如苯酚、氯化鈉或其他標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，這些物質(zhì)的吸收峰位置是已知的。通過測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的吸光度和波長(zhǎng)位置，檢查儀器的波長(zhǎng)精度。如果發(fā)現(xiàn)偏差，可以通過調(diào)整儀器的光學(xué)系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)。

 

　　3.吸光度校準(zhǔn)

 

　　吸光度校準(zhǔn)用于確保光度計(jì)在不同濃度的樣品下能夠準(zhǔn)確測(cè)量吸光度。這通常通過使用一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液來完成，標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需求選擇。通過測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，并與理論值（由比爾-朗伯定律計(jì)算得出）進(jìn)行比較，來驗(yàn)證儀器的吸光度準(zhǔn)確性。如果吸光度偏差較大，則需要進(jìn)行進(jìn)一步的校準(zhǔn)或調(diào)整。

 

　　4.光源校準(zhǔn)

 

　　它的光源隨著使用時(shí)間的增加可能會(huì)出現(xiàn)衰減或不穩(wěn)定現(xiàn)象。定期檢查光源的強(qiáng)度和穩(wěn)定性，確保其在整個(gè)測(cè)量過程中保持恒定。光源的衰減會(huì)直接影響吸光度的準(zhǔn)確性，因此光源校準(zhǔn)可以通過比較標(biāo)準(zhǔn)光源的強(qiáng)度來實(shí)現(xiàn)。

 

　　5.系統(tǒng)線性校準(zhǔn)

 

　　線性校準(zhǔn)用于確保儀器在測(cè)量不同濃度的樣品時(shí)能夠保持良好的線性關(guān)系。通過測(cè)量不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，繪制濃度與吸光度的關(guān)系圖，驗(yàn)證儀器在使用過程中是否存在非線性問題。若發(fā)現(xiàn)非線性偏差，可能需要調(diào)整儀器設(shè)置，或者進(jìn)行其他硬件維修。

 

　　四、校準(zhǔn)頻率和注意事項(xiàng)

 

　　它的校準(zhǔn)應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需求和儀器的使用情況進(jìn)行定期維護(hù)。對(duì)于高精度要求的實(shí)驗(yàn)，建議至少每月進(jìn)行一次校準(zhǔn)；而對(duì)于普通實(shí)驗(yàn)，校準(zhǔn)可以適當(dāng)延長(zhǎng)至每三個(gè)月一次。校準(zhǔn)時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：

 

　　1.環(huán)境條件：校準(zhǔn)應(yīng)在溫度和濕度穩(wěn)定的環(huán)境中進(jìn)行，避免外界環(huán)境的變化影響測(cè)量結(jié)果。

 

　　2.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)，應(yīng)確保其質(zhì)量和濃度的準(zhǔn)確性，避免使用過期或存儲(chǔ)不當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)樣品。

 

　　3.儀器清潔：定期清潔光度計(jì)的樣品池和光學(xué)元件，以避免污漬和塵埃對(duì)測(cè)量結(jié)果的干擾。